99mTc-Tocilizumab un nuevo agente de imagen  molecular en Mieloma Múltiple

Eugenia Gutiérrez; Ximena Camacho; Victoria Calzada; Marcelo Fernández; María Fernanda García; Williams Porcal; Natalia Oddone; María  Moreno; Juan Claudio Benech; Juan A Chabalgoity; Antonio Pandiella; Eloisa Riva; Pablo Cabral

doi:10.35954/SM2012.31.1.2

Autores

Eugenia Gutiérrez Departamento de Radiofarmácia, Centro de Pesquisa Nuclear, Faculdade de Ciências, Universidade da República, Montevidéu, Uruguai.
Ximena Camacho Departamento de Radiofarmácia, Centro de Pesquisa Nuclear, Faculdade de Ciências, Universidade da República, Montevidéu, Uruguai. https://orcid.org/0000-0002-0755-3834
Victoria Calzada Departamento de Radiofarmacia, Centro de lnvestigaciones Nucleares, Facultad de Ciencias, Universidad de la Republica, Montevidéu, Uruguai. https://orcid.org/0000-0003-2679-8981
Marcelo Fernández Departamento de Radiofarmacia, Centro de lnvestigaciones Nucleares, Facultad de Ciencias, Universidad de la Republica, Montevidéu, Uruguai. https://orcid.org/0000-0002-5036-1459
María Fernanda García Departamento de Radiofarmacia, Centro de lnvestigaciones Nucleares, Facultad de Ciencias, Universidad de la Republica, Montevidéu, Uruguai. https://orcid.org/0000-0002-2918-5761
Williams Porcal Grupo de Química Medicinal, Laboratorio de Química Orgánica, Facultad de Ciencias-Facultad de Química, Universidad de la República, Montevidéu, Uruguai.
Natalia Oddone Sinalização celular e nanobiologia, Instituto de Pesquisa Biológica Clemente Estable, Montevidéu, Uruguai.
María Moreno Biotecnologia, Instituto de Higiene, Faculdade de Medicina, Montevidéu, Uruguai. https://orcid.org/0000-0002-7294-6693
Juan Claudio Benech Sinalização celular e nanobiologia, Instituto de Pesquisa Biológica Clemente Estable, Montevidéu, Uruguai.
Juan A Chabalgoity Biotecnologia, Instituto de Higiene, Faculdade de Medicina, Montevidéu, Uruguai.
Antonio Pandiella Centro de Investigación del Cáncer-Instituto de Biología Molecular y Celular del Cáncer, CSIC-USAL, Salamanca, Espanha.
Eloisa Riva Clínica de Hematologia, Hospital de Clínicas, Faculdade de Medicina, Montevidéu, Uruguai. https://orcid.org/0000-0002-4750-034X
Pablo Cabral Departamento de Radiofarmacia, Centro de lnvestigaciones Nucleares, Facultad de Ciencias, Universidad de la Republica, Montevidéu, Uruguai. https://orcid.org/0000-0001-7344-2027

DOI:

https://doi.org/10.35954/SM2012.31.1.2

Palavras-chave:

Hynic; Mieloma múltiplo; Tocilizumab, IL-6 RECL; iL-6 Família Cytokyne; Tricarbonil.

Resumo

A interleucina-6 (IL-6) é uma molécula chave na patogênese do mieloma múltiplo (MM). A sobre-expressão de seu receptor, IL6R, em células MM pode ser usada como alvo para o desenvolvimento de potenciais agentes moleculares para diagnóstico. Tocilizumab (Actemra®) é um anticorpo monoclonal contra a IL6R.
O objetivo deste trabalho é desenvolver e avaliar, através de diferentes métodos químicos e biológicos, a rotulagem de 99mTc-Tocilizumab usando dois agentes quelantes, Succidinimil-hidrazinonicotinamida (HYNIC) e tricarbonil.
Tocilizumab (Roche) foi primeiramente derivatizado com HYNIC e rotulado usando 99mTc/tricine/Sn2Cl à temperatura ambiente. A rotulagem do anticorpo com [99mTc(CO)3(OH2)3]+ foi realizada incubando durante 45 min a 37ºC. A pureza radioquímica (PQR) foi avaliada pela ITLC-SG e HPLC. Estudos de ligação in-vitro e de competição com células MM U266 foram realizados por até 120 minutos. Foram obtidas imagens de microscopia de força fluorescente e atômica de células U266. Estudos in-vivo foram realizados em ratos CD1 normais (n=3).
Um PRQ superior a 90% foi observado com ambos os queladores utilizados, sendo estável e não mostrando nenhuma trans-quelação significativa por pelo menos 24 hs. A microscopia confocal mostrou a capacidade da Tocilizumab-FITC de reconhecer IL6R em células U266. As experiências de ligação e deslocamento in-vitro confirmam a especificidade do reconhecimento do 99mTc-Tocilizumab pelo IL6R. Os estudos de biodistribuição mostraram principalmente absorção hepática e eliminação renal.
A partir dos resultados obtidos, concluiu-se que tanto o Tocilizumab 99mTco4- rotulado via HYNIC quanto o tricarbonil, poderiam ser potenciais agentes de imagem para o diagnóstico do mieloma múltiplo.

Recebido para revisão: junho de 2012.
Aceito para publicação: Agosto de 2012.

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